兔elisa檢測試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被兔骨成型蛋白4（BMP-4）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兔骨成型蛋白4（BMP-4）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
1、血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
2、血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
3、尿液：用無菌管收集。離心20分鐘左右。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4、細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并 放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5、組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
兔elisa檢測試劑盒的標本的采集及保存：
1、血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
2、血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
3、細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
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